生态环境学报 2012, 21(7): 1257-1261 Ecology and Environmental Sciences
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磷细菌筛选及其对苗期玉米生长的影响
于群英 ,陈世勇 ,马忠友 ,汪建飞 ,卫林
1 1 1 1 2
1. 安徽科技学院资源环境系,安徽 凤阳 233100;2. 南京农业大学生命科学学院,江苏 南京 210008
摘要:从潮土、水稻土、砂姜黑土、石灰土上植物根际土壤和根中分离了 86 株 菌,通过 NBRIP 液体摇瓶培养 3 d,培 养液水溶磷质量浓度为 4.2~387.3 mg·L-1,水溶 量浓度与培养液 pH 呈显著负相关(r2=0.621 6) 。筛选出 3 株 菌进行 玉米盆栽试验,结果表明,1 株 菌处理的玉米干物质量和吸 与对照(处理 4)相比无显著差异,2 株 菌处理的 玉米干物质量和吸磷量与对照相比有明显增加,干物质量增加了 19.6%~37.5%,吸磷量增加了 22.7%~40.2%,其中编号为 HCW115 7菌株的效果相当于施用无机磷(P)10 mg·kg-1 处理。 关键词:磷细菌;土壤;玉米 中图分类号:S144.9 文献标志码:A 文章编号:1674-5906(2012)07-1257-05
磷是植物生长发育所必需的营养元素之一,缺 磷会影响植物生长、作物产量和品质。肥料与土壤 是作物 的主要来源,尽管我国土壤 含量差 异较大, 但总的来看, 绝大部分土壤全 量较高, 但其中主要的是植物不能直接吸收利用的无效态 磷,有效态 般仅占土壤全磷的 1%~2%。为了 满足植物生长的需要,人们又不得不不断地向土壤 中施用化学 ,其结果一方面浪费了珍贵的自然 资源;另一方面由于施用方法不当,又会产生一系 列环境问题,如水体富营养化和土壤重金属污染 等,因此土壤磷素资源的合理利用问题是现代农业 生产中比较突出的问题之一。土壤 包括无机 和有机 2 大类, 其中有机磷存在于土壤有机质中, 因为土壤有机质是维持和提高土壤质量的重要物 质,所以土壤有机 源应该加以保护,而土壤中 占土壤全磷总量的 70%以上的无机 是可以充 分利用的磷素资源[1]。在这方面有多种设想[2],其 中利用溶磷细菌或真菌等溶磷微生物分解土壤无 效态无机 使之转化为能为植物直接吸收利用的 有效态 是最为重要的途径之一。溶磷微生物研 究和应用在我国已有 60 多年历史了,人们研究了 溶 生物的种类、分布及其溶磷机理等[3-10],但 是,溶 生产应用却始终没有多大进展,筛选的 溶 在实验室条件下表现出良好的溶 果,但 用于土壤,特别是田间条件下则完全变了样,溶 效果却大大降低,甚至不表现任何效果。因此,筛 选溶磷能力强、稳定、生命力强、适应广的溶 , 与有机物复合制成生物有机肥并用于生产是很有 必要的,也是非常迫切的。
1 材料与方法
1.1 磷细菌筛选 供试样品为小麦、蔬菜、杂草、树木和灌丛植 物根及根际土,采自蚌埠、怀远、凤阳的麦地、菜 地、荒地、林地等,土壤类型有潮土、砂姜黑土、 石灰土、水稻土。 1.1.1 培养基 主要包括分离培养基、 筛选培养基和纯化培养基。 分离培养基(改良后的 PVK 培养基): 葡萄糖 10 g, 三钙 5 g,硫酸铵 0.5 g,氯化钠 0.2 g,硫 酸镁 0.1 g,氯化钾 0.2 g,酵母浸膏 0.5 g,硫酸锰 0.002 g, 硫酸亚铁 0.002 g, 0.4%溴酚蓝 (pH 为 6.7) 6 mL,琼脂 18 g,蒸馏水 1 000 mL。 纯化培养基:葡萄糖 10 g, 三钙 5 g,氯 化镁 5 g,硫酸镁 0.25 g,氯化钾 0.2 g,硫酸铵 0.1 g,蒸馏水 1 000 mL,琼脂 20 g,pH 为 7.0. 筛选培养基(NBRIP) :葡萄糖 10 g, 三 钙 5 g,氯化镁 5 g,硫酸镁 0.25 g,氯化钾 0.2 g, 硫酸铵 0.1 g,蒸馏水 1 000 mL,pH 为 7.0. 1.1.2 磷细菌筛选 分别取根际土壤和用无菌水冲洗干净后 的植物根, 加入 100 mL 无菌水, 分别倒入 2 个 250 mL 无菌三角瓶中, 28.5 ℃条件下, 在 摇床振荡 30 min,采用十倍系列稀释法将 2 种悬浮液逐级稀释 各取 7 个浓度的稀释液 0.1 mL 均匀涂布于 至 10-8, 平板分离培养基上,在 28.5 ℃恒温下培养 3 d,每 个稀释度做 3 个重复,观察平板上菌落的生长情况 及溶磷圈的产生,根据菌落的生长情况及溶 定初选菌,将初选的各个单菌落分别在培养基平板 上进行划线分离及纯化,以获得纯菌株。挑取代表 性纯菌株接种于筛选培养基培养液中, 置于 28 ℃、
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